Sequencing

1) Monoclonal Antibody

세포 주 또는 DNA 없이 항체 단백질로부터 직접 항체 서열을 분석해드리는 서비스입니다. 큐벳은 다양한 기술제휴를 통하여 기존의 hybridoma를 이용한 방법이 아닌, 질량분석기(mass spectrometry)를 통해 항체 단백질의 서열을 빠르고 정밀하게 분석합니다. 큐벳의 항체 분석 기술로 수천개의 단백질 염기 서열을 성공적으로 분석하였으며 국내외 200개 이상의 과학 연구기관으로부터 신뢰를 얻었습니다.

또한, 당사의 분석기술은 질량이 동일한 Isoleucine과 Leucine을 정확하게 구별할 수 있어 정확도 100%의 항체 단백질 sequencing 결과를 보장해드립니다.

  • 1고객 준비 사항

Monoclonal Antibody (100 ug)

* 권장 조건
a) 최소 30X average coverage
b) CDR 부위 ; 최소 5X coverage

  • 1서비스 상세 내용

Ⅰ. 과정 설명

a) Digestion: 여러 효소에 의해 항체를 분해하여 다양한 짧은 펩타이드 서열 형성
b) Separation & ionization: 펩타이드를 2D-LC기법으로 분리 후 이온화
c) LC-MS/MS: 질량분석기를 사용하여 tandem mass spectrometric data 생성
d) Sequencing: 독자적인 de novo sequencing 알고리즘을 이용하여 위의 data를 서열로 변환 

II. 장점


① 100% 정확도를 자랑하는 항체의 서열분석 기술
   * 수천 개의 단백질 서열분석을 통한 대량의 데이터를 기반
② Hybridoma sequencing보다 빠른 처리 기간; sample 당 약 3주
③ 세포 주 또는 DNA 없이 바로 항체로부터 서열을 얻을 수 있어 항체만 존재할 경우에도 시퀀싱 가능
④ Hybridoma로부터 얻는 항체의 30%는 원하는 항체가 아닐 수 있다는 단점에 비해, 항체의 서열정보를 갖고 있으면 항상 동일한 항체를 얻을 수 있음.

2) Hybridoma 

Hybridoma의 유전자를 분석하여 타겟 항원에 부착하는 항체의 서열을 분석하는 서비스입니다. Hybridoma의 특성상 비특이적 항체 유전자를 포함하고 있을 수 있으므로 3~5 개의 클론을 sequencing하고 Fab 형태로 생산하여 ELISA로 항원 특이성을 재확인하여 정확성을 보장합니다. 

* 소요기간: 약 7주
* 큐벳 제공 사항: Variable region 서열, Variable region DNA (H-L chain)

  • 1고객 준비 사항

- Hybridoma cell (>1×106 cells)
- 항원 (50ug)